Incrna熒光定量PCR檢測

　　實驗介紹LncRNA即長鏈非編碼RNA，它是一類轉錄本長度超過200nt的RNA分子，具有類似mRNA結構的polyA尾及啟動子結構，它在分化過程中有動態表達與不同的剪接方式，但是這些RNA卻不編碼蛋白質，而是以RNA的形式在多種層面上，通過表觀遺傳調控、轉錄調控及轉錄后調控等來調控基因的表達水平。

 

　　交付結果：實驗報告、樣本返還

 

　　質量保證：客觀、公正、可信數據結果

 

　　交付時間：大約5-10個工作日（根據預實驗、樣本數量情況決定）

 

　　服務項目：lncRNA RT qPCR檢測、lncRNA qPCR引物引物設計合成

 

　　服務流程1、 依據客戶提供的基因ID或基因名稱設計合成引物（含驗證）

 

　　2、 標準品制備:只針對于絕對定量，相對定量多種內參可供選擇（如：β-actin，GAPDH或客戶提供特異性內參）

 

　　3、 RNA提取及RNA質量分析：采用Invitrogen的TRIzol 進行裂解提取，RNA提取質量有瓊脂糖凝膠電泳及分光光度計雙重質控

 

　　4、 逆轉錄：嚴格按照fermentas的反轉錄試劑盒要求抽取質控合格的RNA，并且可提供oligo(dT)、隨機引物、基因特異性引物以及混合引物幾種模式進行反轉錄，以最大程度的確保反轉錄酶的反轉效率

 

　　5、 預實驗驗證樣品和引物：依據客戶選定內參及基因，對客戶全部樣本內參及個別樣本基因進行驗證，以確保樣本的反轉錄情況及基因的設計

 

　　6、 正式實驗：在以上所有質控合格的情況下，每個樣本每個基因進行四個復孔的重復檢測，確保至少提供三個復孔Ct≤0.5的數據

 

　　7、 實驗報告：提供詳細的實驗報告，包括RNA提取電泳圖、擴增曲線、溶解曲線及數據結果分析

 

　　樣本要求細胞（≥106個）：必須是活細胞，貼壁或懸浮均可

 

　　組織（≥50mg）:盡量新鮮并且切取之后立即置于液氮或-80℃保存

 

　　全血（2ml以上）：抗凝管4℃運輸，短期保存，分離后血清亦可

 

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