石蠟microRNA熒光定量PCR檢測

　　實驗介紹microRNA 長度大約在22nt左右，相對比較穩定，使檢測石蠟組織中microRNA的表達成為可能，據研究表明，石蠟組織與新鮮組織中的microRNA表達水平相似，石蠟組織中的microRNA表達檢測與其保存時間的長短沒有太大關系，可以使研究的樣本來源進一步豐富，特別是珍貴性的樣本來源。

 

　　我們通過不斷改進與摸索建立了一個比較成熟的石蠟組織microRNA實驗體系，包括提取、RNA的嚴格質控、定量，可以為研究人員提供可靠的microRNA定量檢測實驗技術服務

 

　　交付結果：實驗報告、樣本返還

 

　　質量保證：客觀、公正、可信數據結果

 

　　交付時間：大約5-10個工作日（根據預實驗、樣本數量情況決定）

 

　　服務項目

 

　　服務流程1、 依據客戶提供的基因ID或基因名稱設計合成引物（含驗證）

 

　　2、 標準品制備:只針對于絕對定量，相對定量多種內參可供選擇（如：U6，miR16等）

 

　　3、 RNA提取及RNA質量分析：采用Invitrogen的TRIzol 進行裂解提取，RNA提取質量有瓊脂糖凝膠電泳及分光光度計雙重質控

 

　　4、 逆轉錄：嚴格按照fermentas的反轉錄試劑盒要求抽取質控合格的RNA，并且使用基因特異性引物進行反轉錄，以最大程度的確保反轉錄酶的反轉效率

 

　　5、 預實驗驗證樣品和引物：依據客戶選定內參及基因，對客戶全部樣本內參及個別樣本基因進行驗證，以確保樣本的反轉錄情況及基因的設計

 

　　6、 正式實驗：在以上所有質控合格的情況下，每個樣本每個基因進行四個復孔的重復檢測，確保至少提供三個復孔Ct≤0.5的數據

 

　　7、 實驗報告：提供詳細的實驗報告，包括RNA提取電泳圖、擴增曲線、溶解曲線及數據結果分析

 

　　樣本要求石蠟切片（≥10張）：厚度10-20μm，石蠟組織塊或固定組織均可

 

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